合作客戶/
拜耳公司 |
同濟大學 |
聯(lián)合大學 |
美國保潔 |
美國強生 |
瑞士羅氏 |
相關新聞Info
推薦新聞Info
-
> 基于粒徑、速度、表面張力、黏度測定揭示塵粒?霧滴碰撞行為規(guī)律（三）
> 基于粒徑、速度、表面張力、黏度測定揭示塵粒?霧滴碰撞行為規(guī)律（二）
> 基于粒徑、速度、表面張力、黏度測定揭示塵粒?霧滴碰撞行為規(guī)律（一）
> 高鹽低滲油藏中超低界面張力表面活性劑多段塞調(diào)驅(qū)機理與應用效果（三）
> 高鹽低滲油藏中超低界面張力表面活性劑多段塞調(diào)驅(qū)機理與應用效果（二）
> 高鹽低滲油藏中超低界面張力表面活性劑多段塞調(diào)驅(qū)機理與應用效果（一）
> 鈉鉀離子濃度對礦井水和純水表面張力、噴霧霧化特性的影響（三）
> 鈉鉀離子濃度對礦井水和純水表面張力、噴霧霧化特性的影響（二）
> 鈉鉀離子濃度對礦井水和純水表面張力、噴霧霧化特性的影響（一）
> Layzer模型與Zufiria模型研究界面張力對Rayleigh-Taylor氣泡不穩(wěn)定性的影響
DNA測序的原理和規(guī)律
來源：xujinping 瀏覽 1260 次 發(fā)布時間:2022-10-09
化學修飾法測序原理
化學試劑處理末段DNA片段，造成堿基的特異性切割，產(chǎn)生一組具有各種不同長度的DNA鏈的反應混合物，經(jīng)凝膠電泳分離?；瘜W切割反應：包括堿基的修飾，修飾的堿基從其糖環(huán)上轉(zhuǎn)移出去在失去堿基的糖環(huán)處DNA斷裂。
Sanger法測序的原理
就是利用一種DNA聚合酶來延伸結(jié)合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構(gòu)成，每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸(dNTP)，并混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基團，使延長的寡聚核苷酸選擇性地在G、A、T或C處終止。終止點由反應中相應的雙脫氧而定。每一種dNTPs和ddNTPs的相對濃度可以調(diào)整，使反應得到一組長幾百至幾千堿基的鏈終止產(chǎn)物。它們具有共同的起始點，但終止在不同的的核苷酸上，可通過高分辨率變性凝膠電泳分離大小不同的片段，凝膠處理后可用X-光膠片放射自顯影或非同位素標記進行檢測。
DNA測序的規(guī)律
生成互相獨立的若干組帶放射性標記的寡核苷酸，每組寡核苷酸都有固定的起點，但卻隨機終止于特定的一種或者多種殘基上。
由于DNA上的每一個堿基出現(xiàn)在可變終止端的機會均等，因此上述每一組產(chǎn)物都是一些寡核苷酸混合物，這些寡核苷酸的長度由某一種特定堿基在原DNA全片段上的位置所決定。
在可以區(qū)分長度僅差一個核苷酸的不同DNA分子的條件下，對各組寡核苷酸進行電泳分析，只要把幾組寡核苷酸加樣于測序凝膠中若干個相鄰的泳道上，即可從凝膠的放射自影片上直接讀出DNA上的核苷酸順序。